甲基化檢測(cè)MSP

服務(wù)介紹：原理為用亞硫酸氫鈉修飾處理基因組DNA，所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶(C)被轉(zhuǎn)化為尿-嘧啶(U)，而甲基化的胞嘧啶則不變。據(jù)此設(shè)計(jì)針對(duì)甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR。通過(guò)電泳檢測(cè)MSP擴(kuò)增產(chǎn)物，如果用甲基化的引物能得到擴(kuò)增片，,則說(shuō)明該位點(diǎn)存在甲基化。反之，說(shuō)明被檢測(cè)的位點(diǎn)不存在甲基化。若兩對(duì)引物均能得到陽(yáng)性PCR產(chǎn)物，則說(shuō)明該片段部分甲基化。

　　實(shí)驗(yàn)流程：

取材-提取基因組DNA-亞硫酸氫鹽處理-純化DNA- MSP引物合成-PCR擴(kuò)增-電泳-數(shù)據(jù)分析-發(fā)報(bào)告

送樣運(yùn)輸要求：

動(dòng)物組織：新鮮的組織量100 mg(黃豆大小)，最少50 mg（綠豆大?。窘M織、結(jié)締組織、纖維化組織適當(dāng)增加。干冰運(yùn)輸。

植物組織：新鮮的葉、果肉、種子等最少需100 mg。干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞：1×10^6個(gè)細(xì)胞，收集細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

全血：最少1 mL新鮮血液EDTA抗凝管，-20度運(yùn)輸。

DNA：體積≥50 uL，濃度≥ 50 ng/uL。

注：植物樣本的甲基化實(shí)驗(yàn)需要客戶提供具體的啟動(dòng)子序列信息。