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關(guān)于做免疫組化和WB檢測時候抗體的相關(guān)問題答疑

更新時間:2014-04-22      瀏覽次數(shù):2901

1、免疫組化和Western Blot可以用同一種抗體嗎?
答:免疫組化時抗體識別的是未經(jīng)變性處理的抗原決定簇(又稱表位),有些表位是線性的,而有的屬于構(gòu)象型;線性表位不受蛋白變性的影響,天然蛋白和煮后的蛋白都含有;構(gòu)象型表位由于受蛋白空間結(jié)構(gòu)限制,煮后變性會消失。如果你所用的抗體識別的是蛋白上連續(xù)的幾個氨基酸,也就是線性表位,那么這種抗體可同時用于免疫組化和Western,而如果抗體識別構(gòu)象形表位,則只能用于免疫組化。
2、Western Blot 中抗體的可以重復(fù)應(yīng)用嗎?
答:抗體工作溶液一般不主張儲存反復(fù)使用,但是如抗體比較珍貴,可反復(fù)使用23次。稀釋后應(yīng)在23天內(nèi)使用,4度保存,避免反復(fù)凍融。

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