亚洲成A人V欧美综合天堂麻豆,极品白嫩的小少妇,午夜无码一区二区三区在线观看,国产精品理论片在线观看

熱門搜索: 肌酸激酶MB型同工酶(CK-MM)質(zhì)控樣品 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細胞 2%雞紅細胞 1%雞紅細胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術(shù)文章  /  原位雜交實驗的實驗流程和樣本處理注意事項

原位雜交實驗的實驗流程和樣本處理注意事項

更新時間:2023-08-29      瀏覽次數(shù):1591

 原位雜交實驗的實驗流程和樣本處理注意事項

上海信帆提供原位雜交實驗檢測服務(wù)。原位雜交實驗通常流程由組織切片+探針+DAB染色+掃片或者拍照構(gòu)成,那么詳細的操作步驟和對樣本的處理要求具體是什么呢,讓我們一起來探索一下吧!

實驗流程:

  1、組織固定:組織取出洗凈后立即放入固定液(DEPC水配制)中固定2-12h。

  2、脫水:組織固定完成后經(jīng)梯度酒精脫水后浸蠟,包埋。

  3、切片:石蠟經(jīng)切片機切片,攤片機撈片,62°烤箱烤片2h。

  4、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-DEPC水洗。

  5、消化:根據(jù)組織固定時間長短,切片于修復(fù)液中煮沸10-15分鐘,自然冷卻。后基因筆畫圈,根據(jù)不同組織不同指標特性,滴加蛋白酶K(20ug/ml) 37°消化20-30 min。純水沖洗后PBS洗3次×5min。

  6、阻斷內(nèi)源性過氧化物酶:滴加3%甲醇-H2O2,室溫避光孵育15min,將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。

  7、預(yù)雜交:滴加預(yù)雜交液,37°C孵育1h。

  8、雜交:傾去預(yù)雜交液,滴加含探針雜交液, 恒溫箱 37度雜交過夜。

  9、雜交后洗滌:洗去雜交液,2×SSC,37°C 洗10min,1×SSC,37°C洗2×5min,0.5×SSC室溫洗10min。若非特異雜交體較多,可以增加甲酰胺洗滌。

  10、滴加封閉液:滴加封閉血清 BSA。室溫30min。

  11、滴加鼠抗高辛標記過氧化物酶(anti-DIG-HRP):傾去封閉液,滴加anti-DIG-HRP。37°C孵育40min,后PBS洗4次×5min。

  12、DAB顯色:切片稍甩干后,在圈內(nèi)滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下控制顯色時間,陽性為棕黃色,純水沖洗切片終止顯色。

  13、復(fù)染細胞核:Harris蘇木素復(fù)染3min左右,自來水洗,1%鹽酸酒精分化數(shù)秒,自來水洗,氨水返藍,流水沖洗。

  14、脫水封片:將切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min—100%酒精I 6min—100%酒精II 6min-正丁醇6min—二甲苯透明,將切片從二甲苯中拿出稍晾干后,中性樹膠封片。

  15、顯微鏡檢,圖像采集分析。


  結(jié)果判讀:

  陽性為棕黃色,細胞核為藍色。


送樣要求:

1、切片前處理要求:新鮮組織干冰運輸后做冰凍切片;或取2mm左右厚度的新鮮組織,5min內(nèi)投入原位雜交固定液內(nèi)固定,4℃低溫保存運輸,切勿冷凍結(jié)冰,盡快包埋切片后進行原位雜交實驗,固定時間過長影響核酸檢出率;

2、冰凍切片:冰凍切片-20℃運輸;

3、石蠟切片:石蠟切片常溫運輸;

4、細胞爬片:細胞爬片加原位雜交固定液固定15min后,換無酶PBS,密封,4℃運輸。

 

 原位雜交實驗的實驗流程和樣本處理注意事項

微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號B幢7樓

Copyright © 2025 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號:滬ICP備13019554號-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信
久久精品熟女亚洲av麻豆| 中文字幕乱码人妻无码久久| 看同性男aa片| 日本高清视频在线www色| 亚洲av无码第一区二区三区| 99久久精品国产一区二区三区| 人人妻人人澡人人爽精品欧美| 精品香蕉一区二区三区| 中文字幕一区二区人妻| 伊人色综合久久天天伊人| 亚洲精品久久无码午夜一区二区| 女人做爰高潮呻吟17分钟| 人妻丰满熟妇av无码区hd| 精品无码国产一区二区三区51安| 人人妻人人澡人人爽人人精品av| 成人免费无遮挡无码黄漫视频| 东京热av人妻无码| 午夜精品久久久久久| 无码a片观看免费| 国产sm主人调教女m视频| 国产乱来乱子视频| 免费a级毛片在线播放| 国产v亚洲v天堂无码久久久| 久久久不卡国产精品一区二区| 啊轻点灬太粗嗯太深了用力| 亚洲熟女色情网中文字幕| 亚洲 精品 综合 精品 自拍| 99久久人妻精品免费二区| 久久久久久亚洲精品| 亚洲国产精品va在线看黑人| 大又大又粗又硬又爽少妇毛片| 再深点灬舒服灬受不了了视频| 免费网站看sm调教打屁股视频| 亚洲av无码一区二区三区在线| 性饥渴艳妇k8经典a片| 又黄又爽又色的视频| 日韩精品一区二区三区色欲AV| 成人亚洲a片v一区二区三区蜜月| 亚洲精品~无码抽插| 一本久久综合亚洲鲁鲁五月天| 毛片免费看|