亚洲成A人V欧美综合天堂麻豆,极品白嫩的小少妇,午夜无码一区二区三区在线观看,国产精品理论片在线观看

熱門搜索: 肌酸激酶MB型同工酶(CK-MM)質(zhì)控樣品 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細胞 2%雞紅細胞 1%雞紅細胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術(shù)文章  /  細胞凍存液的原理及操作!

細胞凍存液的原理及操作!

更新時間:2021-11-08      瀏覽次數(shù):5462

細胞凍存液的作用及操作!

細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。 細胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細胞損傷。
原理:

細胞冷凍的原理在于盡可能降低細胞內(nèi)的晶體形成,減少細胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細胞造成的低溫損傷,從提高細胞復(fù)蘇時的存活率。細胞凍存的數(shù)量應(yīng)保證復(fù)蘇時低溫保護劑獲得1:10~1:20的稀釋,稀釋后的細胞濃度扔高于正常傳代的細胞濃度為宜,這是因為當?shù)蜏乇Wo劑稀釋10~20倍以后,該濃度一般不會對細胞造成毒性損傷。

操作步驟:

1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;

2. 取對數(shù)生長期的細胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。

3. 去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細胞消化下來;

4. 離心1000rpm,5min;

5. 去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;

6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;

7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;

8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內(nèi)。

注意事項:

1.從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但最好為對數(shù)生長期細胞。

2.將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免凍傷;

3.最好用新配制的培養(yǎng)液。



微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號B幢7樓

Copyright © 2025 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號:滬ICP備13019554號-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信
heyzo无码综合国产精品| 久久www香蕉免费人成| 在线永久免费观看黄网站| 男人j进女人p免费视频| 又硬又粗进去好爽a片看| 欧洲美女与动性zozozo| 少妇被躁爽到高潮无码人狍大战| 久久精品国产亚洲av香蕉| 美女直播全婐app免费| 国产艳妇av在线观看果冻传媒| 女人18毛片a级毛片免费视频| 被多个男人调教奶头玩奶头| 亚洲熟妇无码av不卡在线播放| 成人性生交大片免费看中国| 东北老女人高潮大叫对白| 勃起大粗又硬湿又滑深又长| 亚洲中文无码| 新chinese无套小帅ktv| 亚洲av无码一区二区三区四区| a级a片少妇高潮喷水片| 秋霞电影网院午夜伦不卡a片| 无码人妻丰满熟妇区五十路| 最新欧美精品一区二区三区| 国产午夜福利100集发布| 东京热无码免费a片免费下载| 国产av在线观看| 亚洲精品无码专区在线| 高大丰满肥熟妇丰满大白屁股| 亚洲av永久无码精品| 国产奶头好大揉着好爽视频| 欲妇荡岳丰满少妇a片24小时| 国产又粗又猛又黄又爽无遮挡| 国产精品久久久一区二区三区| 日韩av高清无码| 老师洗澡时让我进去摸她那个| 亚洲精品无码午夜福利中文字幕| 胆小鬼电视剧在线观看完整版| 婷婷色婷婷开心五月四房播播 | 亚洲成av人片天堂网| 刺激videoschina偷拍| 国产乱子伦一区二区三区|