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放射免疫試劑盒實驗操作步驟

更新時間:2018-10-27      瀏覽次數(shù):1763
   放射免疫試劑盒實驗操作步驟
  1.從集市買一只活雞現(xiàn)殺取血5ml(防止污染),放入盛有20ml Alsever’s液瓶中,混勻后置冰箱保存?zhèn)溆茫?周內(nèi)使用)。
  2.使用前,取用Alsever’s液保存的新鮮雞血5ml,加入8ml的0.128 mol/L的NaCl溶液,小心混勻,1000 r/min離心5min,如此3次洗滌,zui后配成30%的雞紅細胞(CRBC)懸液。
  3.取11支試管,按附表中所示測試溶液,分別取樣各3ml,作出標記后,各管均加入紅細胞懸液2滴,混勻后靜置于溫室中,觀察各支試管中發(fā)生溶血的時間及其變化。
  放射免疫試劑盒試驗后觀察結(jié)果
  1.試管內(nèi)液體分兩層:上層淺黃色透明,下層紅色不透明為不溶血(-),鏡檢紅細胞完好呈雙凹盤狀。
  2.如果試管內(nèi)液體混濁,上層帶紅色者,稱不*溶血(+或++),鏡檢有部分紅細胞呈碎片。
  3.如果試管內(nèi)液體變紅而透明者,稱*溶血(+++),鏡檢發(fā)現(xiàn)細胞全部呈碎片。
  實驗建議
  1.雞血在離心時,試管均需在扭力天平上平衡。
  2.目測紅細胞體積或置于帶刻度的離心管中,加入生理鹽水配成30%的紅細胞懸液;
  3.試管中有紅細胞和測試溶液時,不應強力搖晃,以免造成人為的紅細胞破裂。
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