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X-Gal,β-半乳糖苷酶的顯色底物

更新時間:2018-07-11      瀏覽次數(shù):3018

X-Gal,β-半乳糖苷酶的顯色底物

X-Gal,5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷的產(chǎn)品性質(zhì)

上海信帆生物供應X-Gal,5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,現(xiàn)貨供應,歡迎大家!

產(chǎn)品描述

X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會產(chǎn)生藍色產(chǎn)物?;谶@個特點,當pUC系列載體DNA以lacZ 缺欠細胞作為宿主進行轉化時,或M13噬菌體載體DNA進行轉染時,如果在培養(yǎng)基中加入X-Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色而方便地挑選擇出基因重組體。

常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測以及藍白斑篩選。

運輸與保存方法

冰袋運輸。-20 ºC避光保存。

產(chǎn)品性質(zhì)

中文名稱(Chinese Synonym)

5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷

英文名稱(English Synonym)

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside;

5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside

CAS號(CAS NO.)

7240-90-6

分子式(Molecular Fomular)

C14H15BrClNO6

分子量(Molecular Weight)

408.63

外觀(Appearance)

白色至淺黃色粉末

純度(Purity)

>99%

溶解性(Solubility)

溶于DMSO,溶解度可達20mg/mL。也溶于DMF。

結構(Structure)

 

注意事項

1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;

2)含有 X-Gal 的培養(yǎng)基 4℃避光保存,須在1周內(nèi)使用。

配制儲存液

稱取200 mg X-Gal于15 mL 離心管,向其中加入10 mL DMF,旋渦震蕩使其充分溶解后于-20℃避光保存,正確操作下,有效期可達5-12個月,如小量頻繁使用,建議分裝成1 mL/管后避光凍存。

X-Gal,5-溴-4- 氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷的產(chǎn)品性質(zhì)

X-Gal,β-半乳糖苷酶的顯色底物

藍白斑篩選

1. X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

1)高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基,并冷卻到50℃左右。

2)每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入10 μL20 mg/mL X-gal 溶液、10 μL 0.1 M的IPTG(使其終濃度達到1 mM);

3)加入適量抗生素;

4)混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基,待培養(yǎng)基冷卻至室溫后,接種細菌于37℃過夜培養(yǎng)。

2. X-Gal、IPTG加到瓊脂平板表面

1)于無菌超凈工作臺制備平板(如LB 瓊脂板);

2)取40 μL 100 mM IPTG和120 μL 20 mg/mL X-gal混合,均勻地涂布于準備好的平板上;

【注】:平板邊緣較難充分涂布均勻,容易產(chǎn)生假陽性,因此,為了得到更好結果,建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

3)37℃ 孵育直至所有液體被吸收(30 min或更長)。接種細菌于37℃過夜培養(yǎng)。

X-Gal,β-半乳糖苷酶的顯色底物

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