亚洲成A人V欧美综合天堂麻豆,极品白嫩的小少妇,午夜无码一区二区三区在线观看,国产精品理论片在线观看

熱門搜索: 肌酸激酶MB型同工酶(CK-MM)質(zhì)控樣品 抗血漿鑒別試劑盒 甲種胎兒球蛋白抗原 重組核心鏈霉親和素 2(不帶標(biāo)簽) 重組鏈霉親和素(r-ScSA)(NC膜專用) 重組鏈霉親和素(帶His標(biāo)簽) 羊抗人視-黃醇結(jié)合蛋白多克隆抗體 大鼠白細(xì)胞介素1β(IL-1β)試劑盒(ELISA) 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子ELISA試劑盒 1%豚鼠紅細(xì)胞 2%雞紅細(xì)胞 1%雞紅細(xì)胞 重組人線粒體核糖體蛋白S2(MRPS2) 重組人蛋白酶體激活物亞基1(PSME1)蛋白 重組人肝癌衍生生長因子相關(guān)蛋白3 重組人FAM83A蛋白

PRODUCT CLASSIFICATION

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章/ Technical Articles

您的位置:首頁  /  技術(shù)文章  /  信帆生物:常用的免疫組化染色方法

信帆生物:常用的免疫組化染色方法

更新時間:2016-12-27      瀏覽次數(shù):1897

(一)、ABC法:(注,下面各種方法,均為手工操作,如沒特別說明,均在室溫下進(jìn)行)

1.切片經(jīng)二甲苯Ⅰ 5分鐘。

2.切片經(jīng)二甲苯Ⅱ 5分鐘。

3. *Ⅰ 30秒。

4. *Ⅱ 30秒。

5. 95%酒精Ⅰ 30秒。

6. 95%酒精Ⅱ 30秒。

7. 90%酒精 30秒。

8.80%酒精 30秒。

9. 70%酒精 30秒。

10.自來水洗。(后面的切片脫蠟至水一般都是1-10)

11.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鐘。

12.水洗。

13.抗原修復(fù)。

14.PBS洗3次,1分鐘/次。

15.加入血清孵育20分鐘。

16.摔干血清,加入一抗60分鐘。

17.PBS洗3次,2分鐘/次。

18.加入二抗孵育30分鐘。

19.PBS洗3次,2分鐘/次。

20.加入ABC復(fù)合物,孵育30分鐘。

21. PBS洗3次,2分鐘/次。

22.DAB-H2O2孵育切片5-10分鐘。

23.PBS洗,水洗。

24.Harris蘇木素染核5-10分鐘。

25.水洗,分化,藍(lán)化,脫水,透明并封固。

(二)、LSAB法。(SP法)(Labelled streptavidim biotln)

1.切片脫蠟至水。

2.0.3%H2O2甲醇處理切片10-20分鐘。

3.水洗。

4.抗原修復(fù)。

5.PBS洗3次,1分鐘/次。

6.加入血清孵育10分鐘。

7.摔去血清,加入一抗孵育30-60分鐘。

8.PBS洗3次,每次2分鐘。加入二抗,孵育20分鐘。

9.PBS洗3次,每次2分鐘。

10.加入SP復(fù)合物孵育20-30分鐘。

11.PBS洗3次,每次2分鐘。

12.DAB-H2O2孵育5-10分鐘。

13.PBS洗,水洗。

14.Harris蘇木素染核5-10分鐘。

15.水洗,分化 ,藍(lán)化,脫水,透明并封固。

(三)真空負(fù)壓LSAB法

1.切片脫蠟至水。

2. 0.3%H2O2甲醇真空負(fù)壓處理5min.

3. 水洗。

4.如果需要,可進(jìn)行抗原修復(fù)。

5.PBS洗3次,每次1分鐘。

6.加入正常血清真空負(fù)壓處理5min。

7.摔干血清,加入*抗體,真空負(fù)壓處理5分鐘。

8. PBS洗3次,每次2分鐘。

9. 加入二抗(即連接抗體)真空負(fù)壓處理5分鐘。

10.PBS洗3次,每次2分鐘。

11.加入鏈卵蛋白復(fù)合物,真空負(fù)壓處理 5分鐘。

12.PBS洗3次,每次2分鐘。

13.DAB-H2O2孵育5-10分鐘。

14.PBS洗,水洗。

15.染核,分化,藍(lán)化,脫水,透明并封固。

注:真空負(fù)壓即將真空干燥中抽成真空。負(fù)壓達(dá)66.7KPa(500mmHg)

(四)Envision TM Systems.

1.切片脫蠟至水。

2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘。

3.水洗。

4.抗原修復(fù)。

5.PBS洗3次,每次1分鐘。

6.加入一抗體孵育30-60分鐘。

7.PBS洗3次,每次2分鐘。

8.加入增強(qiáng)劑孵育20-30分鐘。

9.PBS洗3次,每次2分鐘。

10.加入酶標(biāo)抗兔/鼠,復(fù)合物,孵育20-30分鐘。

11.PBS洗3次,每次2分鐘。

12.DAB-H2O2孵育5-10分鐘。

13.PBS洗,水洗。

14.Harris蘇木素染核5-10分鐘。

15.水洗,分化,藍(lán)化,脫水,透明并封固。

(五)免疫組化雙染色法。(ⅰ) (Ionmuno-Histochemistry double staimimg method)

1.切片脫蠟至水。

2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘。

3.水洗。

4.抗原修復(fù)。

5.PBS洗3次,每次1分鐘。

6.加入非免疫性動物血清,孵育10分鐘。

7.PBS洗3次,每次2分鐘。

8.加入*抗體孵育60分鐘。

9.PBS洗3次,每次2分鐘。

10.加入生物素化的第二抗體,孵育10分鐘。

11.PBS洗3次,每次2分鐘。

12.加入鏈卵蛋白素過氧化物酶孵育10分鐘。

13.PBS洗3次,每次2分鐘。

14.加入DAB-H2O2孵育5-10分鐘。

15.PBS洗3次,每次2分鐘。

16. 加入雙染增強(qiáng)液,孵育10分鐘。

17. 加入非免疫性動物血清孵育10分鐘。

18. PBS洗3次,每次2分鐘。

19. 加入選用的第二種抗體孵育60分鐘。

20. PBS洗3次,每次2分鐘。

21. 加入生物素標(biāo)記的第二抗體孵育10分鐘。

22. PBS洗3次,每次2 分鐘。

23. 加入鏈卵蛋白素堿性磷酸酶孵育10分鐘。

24. PBS洗3次,每次2分鐘。

25. 加入AEC溶液,孵育5-10分鐘。

26. 自來水洗。

27. 蘇木素染核5-10分鐘。

28. 水性封片。

注:1.*種復(fù)合物也可先用鏈卵蛋白素堿性磷酸酶。

2.第1次顯色也可用BCIP/NBT溶液,顏色為藍(lán)黑色,但應(yīng)與蘇木素鑒別。

(六)、免疫組化的雙染色法(ⅱ) (Immuno-histochemistry double staining method)

1.切片脫蠟至水。

2.0.3%H2O2甲醇處理切片10分鐘。

3.水洗。

4.抗原修復(fù)。

5.PBS洗3次,每次1分鐘。

6.加入選用的*抗體孵育30-60分鐘。

7.PBS洗3次,每次2分鐘。

8.加入增強(qiáng)劑孵育20-30分鐘。

9.PBS洗3次,每次2分鐘。

10.加入酶標(biāo)抗兔/鼠,復(fù)合物,孵育

11.PBS洗3次,每次2分鐘。

12.加入DAB-H2O2孵育5-10分鐘

13.PBS洗3次,每次2分鐘。

14.加入選用的第二種抗體孵育60分鐘。

15.PBS洗3次,每次2分鐘。

16. 加入增強(qiáng)劑孵育20-30分鐘。

17. PBS洗3次,每次2分鐘。

18. 加入酶標(biāo)抗兔/鼠堿性磷酸酶復(fù)合物孵育20-30分鐘。

19.PBS洗3次,每次2分鐘。

20.加入AEC溶液孵育5-10分鐘。

21.自來水洗。

22.蘇木素染核5-10分鐘。

23.水性封片。

(七)細(xì)胞培養(yǎng)片免疫熒光染色法。

1.將細(xì)胞于載片或蓋玻片的片子用生理鹽水洗幾次。

2.純丙酮固定10分鐘。

3.PBS浸洗3次,每次1分鐘。

4.加入選用的*抗體孵育120分鐘。

5.PBS洗3次,每次2分鐘。

6.加入熒光抗體孵育60分鐘以上。

7.PBS法3次,每次2分鐘。

8.0.1%伊文氏藍(lán)襯染3分鐘。

9.水洗,蒸餾水洗。

10. 水性膠封片或用緩沖甘油封片。

(八)真空負(fù)壓免疫熒光染色法染細(xì)胞培養(yǎng)片。

1. 將細(xì)胞爬于載玻片或蓋玻片的片子用生理鹽水浸洗數(shù)次,*洗去蛋白液。

2.純丙酮固定5-10分鐘。

3.PBS浸洗3次,每次1分鐘。

4.加入選用的*抗體孵育真空負(fù)壓處理15分鐘。

5.PBS洗3次,每次2分鐘。

6.加入熒光抗體孵育真空負(fù)壓處理15分鐘。

7.PBS洗3次,每次2分鐘。

8.0.1%伊文氏藍(lán)襯染3分鐘。

9.水洗,蒸餾水洗。

10.水性膠封片或用緩沖甘油封片。

微信掃一掃

郵箱:1170233632@qq.com

傳真:021-51870610

地址:上海市顧戴路2988號B幢7樓

Copyright © 2025 上海信帆生物科技有限公司版權(quán)所有   備案號:滬ICP備13019554號-1    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)

TEL:13764793648

掃碼加微信
白洁一晚挨十二炮| 日韩av高清无码| 亚洲av成人无码精品电影在线| 国产精品久久欧美久久一区| 国产特级毛片a片www| 极品少妇被猛得白浆直流草莓视频| 扒开美女内裤狂揉下部| 伊人思思久99久女女精品视频| 国产spa盗摄xo在线观看| 国产精品无码一区二区在线观一| 青青草视频在线| 亚洲国产成人精品无码区在线观看| 国产一区二区精品丝袜| 被男狂揉吃奶胸60分钟视频| 国产精品女同一区二区| 破了亲妺妺的处免费视频国产| 亚洲欧美日韩精品久久亚洲区 | 免费看片a级毛片免费看| 中文字幕乱码熟女人妻水蜜桃| 亚洲精品无码国产| 亚洲日韩av在线观看| 亚洲精品无码高潮喷水a片| 中文字幕一区二区人妻| 好男人在线社区www在线影院| 护士奶头又白又大又好摸视频| 人妻无码一区二区三区四区| 色国产色无码色欧美色在线| 亚洲精品国产成人| 人人妻人人澡人人爽| 好爽…又高潮了毛片免费看| 久久天天躁狠狠躁夜夜av| 强睡邻居人妻中文字幕| 上流社会在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久a| 国产成人精品白浆久久69| 亚洲精品无码| 国产探花在线精品一区二区| 国产+高潮+白浆+无码| 苏桃的骚乱文肉np| 国产高潮国产高潮久久久| 国产午夜成人免费看片无遮挡|